ENFERMEDADES INFECCIOSAS Y VULNERABILIDAD SOCIAL

Concurso

2018

Amplificación isotérmica y sistema CRISPR/Cas para el diagnóstico molecular de infecciones por Leishmania y Trypanosoma cruzi en centros de atención de salud pública

Patricio Diosque

Instituto de Patología Experimental

La Enfermedad de Chagas y las leishmaniasis son patologías endémicas en Argentina que afectan a personas en contextos sociales vulnerables, las cuales en general requieren del sistema de salud público. La principal estrategia de control de estas enfermedades constituye su detección temprana, por lo cual resulta de gran interés el desarrollo de métodos sensibles, específicos y principalmente de bajo costo. Este proyecto propone el desarrollo de una plataforma de diagnóstico molecular rápido, preciso, sensible y de fácil implementación en centros de salud con recursos limitados. El sistema está basado en la detección rápida y precisa de secuencias de ADN de T. cruzi y Leishmania usando la endonucleasa Cas12a la cual es guiada por moléculas de ARN guía hacia las secuencias blanco. Se identificarán y amplificarán (de forma isotérmica) secuencias de la región hipervariable de los minicírculos de T. cruzi y Leishmania que posean motivos reconocibles por complejos ribonucleoproteicos Cas12a/ARN guía. Esta reacción podrá ser detectada visualmente utilizando un sistema de inmunocromatografía en tiras de flujo lateral. La eficacia diagnóstica de estos métodos se estimará utilizando muestras de pacientes obtenidas previamente. La plataforma de diagnóstico estandarizada se utilizará alternativamente para identificar la variabilidad genética de T. cruzi y Leishmania. Este proyecto generará un método de diagnóstico molecular para la detección de ADN de estos parásitos transferibles y aplicables en centros de atención de salud pública.

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